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NKM-1人白血病细胞 含STR鉴定

NKM-1人白血病细胞 含STR鉴定

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待细胞稳定后,调回PBS量10%,对于初次实验者,一般细胞培养,都需要加入双抗防止细胞污染,细胞汇合度达到90%,我们开始寄送,这样可以保持细胞收到时,良好的细胞活力。

  • 产品描述

NKM-1人白血病细胞 含STR鉴定

【中文缩写】A3

【中文名称】A3人T淋巴白血病细胞

【背景资料】 见细胞说明书

【产品来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系

"公司提供贴壁、半贴壁、悬浮、半悬浮、贴壁与悬浮混合等细胞特性,一般细胞培养PBS量是10%,如果出现细胞状态不良情况,可以提高PBS量到15%,SHEE人永生化食管上皮细胞待细胞稳定后,调回PBS量10%,对于初次实验者,一般细胞培养,都需要加入双抗防止细胞污染,细胞汇合度达到90%,我们开始寄送,这样可以保持细胞收到时,良好的细胞活力。

一、售前
         上海素冉生物专业为国内科研提供高品质细胞和优质服务,QC检测合格后发货保证细胞状态良好,发货前保证质量。
 
二、售后
         收到细胞7天内出现状态不佳等情况请及时反馈,会有技术同步指导操作协助解决,如仍未养活免费重发。建议及时保种,有备无患!
 
三、细胞生长条件:

培养条件   

GIBCO(培养基90% +10%FBS)

温度                   

                    37℃

空气条件  

5% CO2,,95% AIR

传代方法

1:2传代,2~3天换液

冻存条件

90%FBS+10%DMSO

 
四、细胞收到后处理
    细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的zui好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml完全培养液,悬浮细胞需离心处理,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。
 NKM-1人白血病细胞|NKM-1细胞 含STR鉴定


五、细胞培养步骤
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中,加入约6ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
一,烧瓶培养的处理程序 在培养瓶中接种细胞并在培养基中完全填充培养基以防止运输过程中细胞的丢失。 1、收到后,目视检查培养物是否有微生物污染的宏观证据。 使用倒置显微镜(zui好配备有相位传感器),仔细检查是否有微生物污染的证据。还检查以确定大多数细胞是否仍然附着在烧瓶底部?在运输过程中,培养物有时被粗略地处理,并且许多细胞经常分离并悬浮在培养基中(但仍然是可行的)。 2、如果细胞仍然附着,无菌去除5至10毫升的运输介质。可以节省运输媒介以重复使用。在5%℃的空气中,在37℃下培养细胞,直到它们准备进行传代培养。 3.如果细胞没有附着,无菌地移除烧瓶的全部内容物,并以1000rpm离心5至10分钟。取出运输介质并保存。在10毫升这种培养基中重新沉淀颗粒细胞并加入25厘米的烧瓶中。在空气中5%℃下,在37℃下孵育,直至细胞准备进行传代培养。   二、传代程序 体积为75厘米的烧瓶。增加或减少其他尺寸培养容器所需的分离培养基的量。 1、去除和丢弃培养基。 2.用0.25%(w/v)胰蛋白酶0.53mM EDTA溶液冲洗细胞层,除去所有含有胰蛋白酶抑制剂的血清痕迹。 3.添加2.0~3.0 ml胰酶-EDTA溶液瓶中,倒置显微镜下观察细胞到细胞层分散(取决于胰蛋白酶的批)。 注意:为了避免结块,不要在击打或摇晃瓶子时搅拌细胞,等待细胞分离。难以分离的细胞可以放置在37°C以促进扩散。 4、加入6~8毫升的完整生长培养基,轻轻吸液,抽吸细胞。 5、在新培养容器中加入适当的细胞悬液等分试样。 6、培养37°C培养基。 推荐栽培比为1:3∶1:4。 介质更新:每周2至3次   三、冷冻保存程序 该协议使用量在75平方厘米的瓶;比例减少或增加的其他尺寸的分离介质的培养容器的数量。 1、去除和丢弃培养基。 2。简要冲洗细胞层0.25(w/v)trypsin0.53mm EDTA溶液去除所有痕迹血清含有胰蛋白酶抑制剂。 3。加入2至3毫升的胰蛋白酶-EDTA溶液瓶中,倒置显微镜下观察细胞到细胞层是分散的(通常在1到10分钟)。 注意:为了避免结块,不要在击打或摇晃瓶子时搅拌细胞,等待细胞分离。难以分离的细胞可以放置在37°C以促进扩散。 4、加入6~8毫升的完整生长培养基,轻轻吸液,抽吸细胞。 5。去除胰酶EDTA溶液,将细胞悬液到离心管和旋转约5 1000rpmfor 10分钟。 6、低温保存培养液中的上清液和复苏细胞。 7、将细胞转移至低温瓶,1ml/瓶。 8、低温容器中的细胞Frozen(NalgENα5100-01)。

 

 


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