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HUVEC细胞|HUVEC人脐静脉内皮细胞 已通过STR鉴定点击次数:192 发布时间:2019-04-12

上海素冉生物有限公司提供ATCC原代细胞,ATCC菌株代购,同时上海素冉生物新增细胞库,具有自己的研发细胞培养库,上千株细胞具有STR鉴定,开春大放送,价格优惠,同时还有好礼相送,具体欢迎咨询我们销售人员。。。。

 

HUVEC细胞|HUVEC人脐静脉内皮细胞 已通过STR鉴定

【中文缩写】HUVEC

【中文名称】 HUVEC人脐静脉内皮细胞

【背景资料】 见细胞说明书

【产品来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系,我们这株细胞来源于婴儿的脐带,目前P1-P3代都有,已做过鉴定

"公司提供贴壁、半贴壁、悬浮、半悬浮、贴壁与悬浮混合等细胞特性,一般细胞培养PBS量是10%,如果出现细胞状态不良情况,可以提高PBS量到15%,SHEE人永生化食管上皮细胞待细胞稳定后,调回PBS量10%,对于初次实验者,一般细胞培养,都需要加入双抗防止细胞污染,细胞汇合度达到90%,我们开始寄送,这样可以保持细胞收到时,良好的细胞活力。

  • 售前
             上海素冉生物专业为国内科研提供高品质细胞和优质服务,QC检测合格后发货保证细胞状态良好,发货前保证质量。
     
    二、售后
             收到细胞7天内出现状态不佳等情况请及时反馈,会有技术同步指导操作协助解决,如仍未养活免费重发。建议及时保种,有备无患!
     
    三、HUVEC细胞培养说明书

细胞名称

HUVEC 人脐静脉内皮细胞

货号

CQ

种属

生长特性

贴壁  上皮样

培养条件

培养基:ENDOTHELIAL CELL MEDIUM(Sciencell,1001)

温度:37℃     气相:95%空气,5% CO2

传代

1. 用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液

2.待细胞长至80-90%时,需要对其进行传代,推荐传代比例为1:2至1:3

3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为zui佳消化时间,记录zui佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心5min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。

保存

冻存条件:80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO

(备注:建议使用本公司的冷冻液(H-W-100),用4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。)

保存条件:液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。

2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时)

3.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。

 

 
四、细胞收到后处理
    细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的zui好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml完全培养液,悬浮细胞需离心处理,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。
 
五、细胞培养步骤
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中,加入约6ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
 
1、贴壁细胞,传代参考如下:
①. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
②. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
③. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
 
HUVEC细胞|HUVEC人脐静脉内皮细胞 已通过STR鉴定

2、悬浮细胞,传代参考如下:
方法①:收集细胞,1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心5分钟,去除上清,按冻存数量加入血清及DMSO,冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
 
   刚收到细胞时,胎牛血清可以用15%培养两三天,利于细胞尽快恢复状态,细胞稳定后
再调回10%即可
   收到细胞后如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要参考依据,请您务必重视。

 

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